การศึกษาความคงตัวในการเก็บรักษาผงเอนไซม์โบรมีเลน

ผงเอนไซม์โบรมีเลนเป็นระบบเอนไซม์ไฮโดรไลซ์โปรตีนที่มีอยู่ในพืชแขวนสับปะรด มีการใช้งานที่หลากหลายในอุตสาหกรรมอาหารและยา อย่างไรก็ตาม ความเสถียรที่ไม่ดีส่งผลกระทบต่อการใช้งาน โดยเฉพาะในอุตสาหกรรมยา ในบทความนี้ ได้ทำการศึกษาผลกระทบของสภาวะความชื้น สภาวะอุณหภูมิ และ "การแผ่รังสีคอยน์ต่อโปรตีเอสสับปะรดด้วยวัตถุดิบของโปรตีเอสสับปะรดทางเภสัชกรรม

1 วัสดุและวิธีการ
1.1 วัตถุดิบโบรมีเลน
ผงเอนไซม์โบรมีเลน
1.2 ผลกระทบของสภาพแวดล้อมที่มีความชื้น
เอนไซม์ที่ชั่งน้ำหนักและจ่ายถูกวางอย่างเปิดเผยในเครื่องดูดความชื้นแบบปิด (อุณหภูมิห้อง) ใส่ซิลิกาเจล, สารละลายอิ่มตัว NaQ และ KNO, สารละลายอิ่มตัวไว้ภายในเครื่องดูดความชื้น ความชื้นสัมพัทธ์ของสภาพแวดล้อมภายในคือ 0.1 เปอร์เซ็นต์ (75±1) เปอร์เซ็นต์ 2.92 เปอร์เซ็นต์ และเก็บตัวอย่างตามช่วงเวลาสม่ำเสมอเพื่อตรวจสอบการทำงานของเอนไซม์
1.3 ผลกระทบของอุณหภูมิ
เอนไซม์ที่ชั่งน้ำหนักและแบ่งส่วนจะถูกวางไว้ที่อุณหภูมิ 1~4 องศา 29 องศา และ 55 องศา ตามลำดับ และเก็บตัวอย่างเป็นระยะเพื่อตรวจวัดการทำงานของเอนไซม์
1.4 การรักษาด้วยรังสี
เอนไซม์ที่ชั่งน้ำหนักและจ่ายถูกปิดผนึกอย่างแน่นหนาในหลอดหมุนเหวี่ยงพลาสติก (PVC) ตัวอย่างถูกฉายรังสีด้วย "รังสีคอยล์" ที่อุณหภูมิห้อง (~20 องศา ) อัตราขนาดยาคือ 198 kGy/h และขนาดยาที่ดูดซึมคือ 4 kGy8 kGy และ 12 kGy 3 วันหลังจากการฉายรังสีตัวอย่าง จะพิจารณากิจกรรมของเอนไซม์และจำนวนแบคทีเรียทั้งหมด

1.5 วิธีการกำหนด
หาโบรมีเลนโดยวิธี FIP ไทโรซีนไฮโดรไลซ์จากเคซีนถูกหาปริมาณด้วยเครื่องสเปกโตรโฟโตมิเตอร์ UV และประเมินการทำงานของเอนไซม์ เคซีนถูกใช้เป็นสารตั้งต้นและไฮโดรไลซ์โดยโปรตีเอสสับปะรด
หาจำนวนแบคทีเรียทั้งหมดโดยใช้วิธีการนับโคโลนีของเพลต

2 ผลลัพธ์
2.1 ผลของสภาวะความชื้นต่อการเก็บรักษาผงเอนไซม์โบรมีเลน
ผลลัพธ์ของผลกระทบของสภาวะความชื้นต่อการเก็บรักษาโบรมีเลนแสดงไว้ในตารางที่ 1 ดังที่เห็นในตารางที่ 1 กิจกรรมของเอนไซม์โบรมีเลนค่อนข้างคงที่ในสภาพแวดล้อมที่แห้ง อัตราการยับยั้งเอนไซม์ถูกเร่งตามการเพิ่มขึ้นของความชื้นโดยรอบ ในช่วงท้ายของการทดลอง กิจกรรมของเอนไซม์ลดลงอย่างมีนัยสำคัญภายใต้สภาวะที่มีความชื้นสูง มีเพียง 40.4 เปอร์เซ็นต์เท่านั้น 14.4 เปอร์เซ็นต์ของการทำงานของเอนไซม์ยังคงอยู่หลังจากการเก็บรักษาโบรมีเลน 105 วันและ 315 วัน ตามลำดับ ในขณะที่การคงสภาพการทำงานของเอนไซม์อยู่ที่ร้อยละ 80.3 และร้อยละ 80.0 ภายใต้ความชื้นสัมพัทธ์ (75 บวก 1) เปอร์เซ็นต์

สามารถมองเห็นได้จากรูปประกอบว่าภายใต้ความชื้นที่แห้งหรือต่ำ การยับยั้งโปรตีเอสของสับปะรดเกิดขึ้นในช่วงต้นถึงปลายของการเก็บรักษาซึ่งลดระดับลง เนื่องจากความชื้นของเอนไซม์มีมากกว่าความชื้นโดยรอบในระยะแรกของการเก็บรักษา ความชื้นที่สูงขึ้นจะทำให้โครงสร้างของเอนไซม์มีความยืดหยุ่น โครงสร้างของแอคทีฟเซ็นเตอร์ของเอนไซม์มีแนวโน้มที่จะเปลี่ยนแปลง เมื่อเอนไซม์ไปถึงถนนระดับเดียวกับสภาพแวดล้อมที่แห้ง ความชื้นของเอนไซม์จะลดลงและกิจกรรมของเอนไซม์มีแนวโน้มที่จะคงตัว นอกจากนี้ยังเห็นได้จากรูปที่กิจกรรมของเอนไซม์ลดลงภายใต้สภาพแวดล้อมที่มีความชื้นสูง เหตุผลนี้เกิดจากการไฮโดรไลซิสของโปรตีเอสเอง นอกเหนือจากความชื้นที่สูงยังช่วยเพิ่มความยืดหยุ่นของโครงสร้างเอนไซม์อีกด้วย

2.2 ผลของสภาวะอุณหภูมิต่อการเก็บรักษาผงเอนไซม์โบรมีเลนผัก
ตารางที่ 2 แสดงผลการสำรวจว่าอุณหภูมิส่งผลต่อการเก็บรักษาโปรตีเอสของสับปะรดอย่างไร โปรตีเอสของสับปะรดถูกปิดใช้งานที่อุณหภูมิสูงและต่ำ ดังแสดงในตารางที่ 2 โดยที่อุณหภูมิสูงจะมีความเสถียรน้อยกว่า อัตราการปิดใช้งานจะเร็วขึ้นในระยะแรกของการจัดเก็บ และปานกลางมากขึ้นในระยะหลัง อัตราการเก็บรักษาของเอนไซม์หลัง 285 วัน ที่ 51 องศา (68.0 เปอร์เซ็นต์ ) มากกว่านั้นหลังจาก 105 วัน ที่ความชื้นสูง (40.4 เปอร์เซ็นต์ ) ในกรณีนี้ ผลกระทบของอุณหภูมิต่อเอนไซม์น้อยกว่าความชื้นอย่างมาก ผลกระทบของอุณหภูมิต่อเอนไซม์มีค่าน้อยกว่าความชื้นอย่างมาก

2.3 ผลของรังสี 60Cor ต่อฤทธิ์ของโปรตีเอสของสับปะรดและฤทธิ์ฆ่าเชื้อแบคทีเรีย
ผลลัพธ์ของผลของรังสี 60Cor ต่อฤทธิ์ของสับปะรดโปรตีเอสและฤทธิ์ในการฆ่าเชื้อแสดงไว้ในตารางที่ 3 ดังแสดงในตารางที่ 3 การสูญเสียการทำงานของเอนไซม์คือร้อยละ 10.6 , 11.0 เปอร์เซ็นต์ และ 15.5 เปอร์เซ็นต์ เมื่อ ปริมาณการดูดซึมคือ 4 kGy 8 kGy และ 12 kGy ตามลำดับ ผลการฆ่าเชื้อเทียบเคียงได้ร้อยละ 99.9 ร้อยละ 100 และร้อยละ 100 ตามลำดับ เพื่อลดการสูญเสียการทำงานของเอนไซม์ สามารถเลือกขนาดยา 4 kGy หรือ 8 kGy ตามการส่งต่อของแหล่งเอนไซม์ เป็นปริมาณสารฆ่าเชื้อราทั้งฆ่าเชื้อและลดการสูญเสียการทำงานของเอนไซม์

3 การอภิปราย
ในการทดลองนี้ ความไวของเอนไซม์ต่อความชื้นสูงกว่าอุณหภูมิ อัตราการรอดชีวิตของเอนไซม์ภายใต้สภาพแวดล้อมการทำให้แห้งด้วยซิลิกาเจลนั้นดีกว่าภายใต้อุณหภูมิต่ำ และอัตราการยับยั้งเอนไซม์ภายใต้สภาพแวดล้อมที่มีความชื้นสูงนั้นสูงกว่าที่อุณหภูมิต่ำกว่า 55 องศาอย่างมีนัยสำคัญ สภาพแวดล้อมที่มีความชื้นสูงทำให้ปริมาณความชื้นของเอนไซม์เพิ่มขึ้น และกลายเป็นปัจจัยหลักในการยับยั้งการทำงานของเอนไซม์ สิ่งนี้เกี่ยวข้องอย่างใกล้ชิดกับการไฮโดรไลซิสของโปรตีเอสสับปะรด ดังนั้นในการผลิตเราควรใส่ใจเป็นพิเศษกับความชื้นของสภาพแวดล้อมที่เก็บเอนไซม์และความแห้งของเอนไซม์เอง นอกจากนี้ยังมีการยับยั้งเอนไซม์เมื่อ "ใช้รังสีคอยฆ่าเชื้อโปรตีเอสสับปะรด จะปรับปรุงความเสถียรในการเก็บรักษาและการฆ่าเชื้อโบรมีเลนต่อไปได้อย่างไร ความเสถียรในการฆ่าเชื้อของโปรตีเอสสับปะรด จำเป็นต้องมีการวิจัยเพิ่มเติมเพื่อเลือกสารเติมแต่งที่มีประสิทธิภาพซึ่งก็คือ วิธีที่ดีที่สุดในการปรับปรุงเสถียรภาพของการเก็บรักษาและการฆ่าเชื้อของผงเอนไซม์โบรมีเลน สารเติมแต่งจะเป็นหนึ่งในวิธีการ

Guanjie จัดหาผงเอนไซม์โบรมีเลนจำนวนมากโดยใช้วิธีทดสอบ GDU กระบวนการผลิตของเราดำเนินการภายใต้เวิร์คช็อปมาตรฐาน CGMP โดยใช้สายการผลิตสามสายในโรงงานสองแห่ง และห้องปฏิบัติการอิสระสองแห่ง หากมีข้อสงสัยเกี่ยวกับผลิตภัณฑ์ของเรา กรุณาติดต่อเราได้ที่info@gybiotech.com.